描述
Description
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NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2 (IL-2) 依赖型NK细
胞株。 这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示NK-92细胞能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射
以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。该细胞系依赖于重组Il-2的存在，低至
10 U/mL的剂量足以维持增殖;在缺乏IL-2的情况下，细胞会在72小时内死亡。. NK-92细胞有以下特征： CD2, CD7, CD11a,
CD28, CD45, CD54, CD56表面标记阳性；CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34和
HLA-DR表面标记阴性。
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培养基和添加剂
Complete Growth Medium and Culture Conditions
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气相：空气，95%；二氧化碳，5%。
温度：37摄氏度。
培养参考：传代比例1:2，传代周期4-5天
冻存液配方：完全培养液92%，DMSO 8%
细胞运输方式：活细胞可保温运输或干冰冻存管。
注意事项：
（1）细胞除首//次传代需离心收集细胞，后续细胞换液或传代时建议使用半换液法，即换液或传代时待细胞自然沉降后，弃
去一半旧培养液，之后可直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀或移入两个新的T25 培养瓶中（1:2
传代），补充新的完全培养基至8-10ml/瓶即可。
（2）细胞生长状态呈现细胞聚团生长。细胞在培养过增殖细胞碎片多、颗粒多是正常现象。当细胞密度较大或者培养液变黄
时，需要及时进行半换液或者完全换液。在换液过程中尽量冲散细胞。
（3）NK-92细胞较难复苏，复苏初期细胞生长缓慢(一周左右），会有部分细胞破碎，会出现大量死细胞和死细胞碎片，培养
两周后有所好转。建议每1-2周对细胞进行1000rpm，离心5 min，弃掉上清，加入新鲜完全培养液，可以去掉部分细胞碎片和
颗粒。培养过程中会出现死细胞和细胞碎片，收到邮寄的活细胞的用户若发现培养物内有部分死细胞和细胞碎片，此为正常现
象。细胞碎片不影响细胞常生长，中间可换液一次。待细胞恢复正常生长速度后可进行传代培养（半换液法)。由于此细胞复苏
周期长生长慢，建议高密度细胞冻存（T25培养瓶1瓶约含106 细胞量建议冻存1支）
（4）请注意保持细胞密度在合适的范围（3x105 ~ 3x106 /ml），不能过稀。
（5）此细胞系的成功生长很大程度上取决于生长培养基中使用的 IL-2 的质量。 建议使用*高质量的 IL-2。
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