RSC-96 大鼠雪旺细胞简介

起源与背景

细胞特性

1. 形态与生长特性
   • 形态：贴壁生长，正常培养时呈梭形或多边形，胞体较小，有 2~3 个细长突起；诱导分化后可形成类似髓鞘的膜性结构或细胞间连接。
   • 增殖能力：永生性细胞系，可无限传代（建议使用 20 代以内以保持表型稳定），增殖速度较快，传代周期约 2~3 天（密度达 70%~80% 时传代）。
2. 表型与功能特性
   • 特异性标记：
     • 高表达雪旺细胞标志物：S100β（胞质和核内均有表达）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、髓鞘蛋白零（P0）、神经细胞黏附分子（NCAM）等。
     • 低表达或不表达成纤维细胞标记（如波形蛋白 Vimentin），可通过免疫荧光或流式细胞术鉴定纯度。
   • 功能模拟：
     • 髓鞘形成相关：在轴突（如共培养的背根神经节神经元）或诱导剂（如维甲酸、cAMP 类似物）存在下，可表达髓鞘相关基因（如 MBP、PLP），模拟体内髓鞘形成过程。
     • 神经营养因子分泌：分泌神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）等，支持神经元存活与再生。
     • 损伤修复响应：对促炎因子（如 TNF-α）、氧化应激（H₂O₂）或神经毒性物质（如化疗药物紫杉醇）敏感，可用于研究雪旺细胞在神经病变中的损伤机制。

培养与保存

1. 培养条件
   • 培养基：常用含 10% 胎牛血清（FBS）的 DMEM/F12（1:1）混合培养基，或专用雪旺细胞培养基（如添加 EGF、FGF-2 等生长因子以促进增殖），部分实验室添加 1% 青霉素 - 链霉素双抗。
   • 环境：37℃、5% CO₂恒温培养箱，湿度 95% 以上，pH 维持 7.2~7.4。
   • 传代方法：0.25% 胰酶 - EDTA 短暂消化（约 1~2 分钟，避免过度消化损伤细胞），轻柔吹打为单细胞悬液，传代比例通常为 1:2~1:3。
2. 冻存与复苏
   • 冻存液：含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM/F12 培养基，细胞密度调整为 1×10⁶~5×10⁶ cells/mL，程序降温（-80℃过夜后转液氮）。
   • 复苏要点：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后接种于含 15% FBS 的培养基中，24 小时后更换新鲜培养基以清除死细胞。

应用领域

1. 周围神经损伤与再生研究
   • 模拟神经挤压伤、切割伤后雪旺细胞的活化与增殖，探究 Wnt/β-catenin、Notch 等通路在神经修复中的作用。
   • 评估干细胞（如间充质干细胞）或生物材料（如壳聚糖支架）与 RSC-96 共移植对神经再生的促进效果。
2. 脱髓鞘疾病模型
   • 研究自身免疫性脱髓鞘（如格林 - 巴利综合征）中雪旺细胞与免疫细胞（T 细胞、巨噬细胞）的相互作用，分析补体介导的髓鞘损伤机制。
   • 筛选免疫调节药物（如干扰素 β）或神经营养因子对雪旺细胞功能的保护作用。
3. 髓鞘形成机制研究
   • 利用 RSC-96 与神经元共培养体系，探讨轴突信号（如 Neuregulin-1）调控雪旺细胞分化和髓鞘包裹的分子机制。
   • 研究表观遗传调控（如组蛋白修饰、非编码 RNA）对髓鞘相关基因表达的影响。
4. 药物神经毒性评估
   • 检测化疗药物（如顺铂、长春新碱）或重金属（如铅）对雪旺细胞的毒性作用，通过 MTT、流式细胞术分析细胞凋亡或坏死。
   • 开发神经保护剂（如 α- 硫辛酸、维生素 B12）的体外筛选模型。

局限性与注意事项

• 永生化的影响：逆转录病毒转染可能导致原癌基因激活（如 v-abl），与原代雪旺细胞相比，RSC-96 的增殖能力更强，但分化潜能可能受限（如髓鞘形成能力较弱），需结合原代细胞或动物模型验证。
• 培养纯度控制：部分批次细胞可能混杂成纤维细胞（尤其传代次数较高时），建议通过差速贴壁法（成纤维细胞贴壁更快）或添加抗成纤维细胞试剂（如阿糖胞苷）纯化。
• 诱导分化条件优化：若需研究髓鞘形成，需优化共培养体系（如神经元与雪旺细胞比例、细胞外基质成分）或使用特定诱导剂（如 forskolin 提高 cAMP 水平）。