Jurkat D,E 人 T 淋巴瘤细胞(Tet-on 基因修饰)
Jurkat D,E 人 T 淋巴瘤细胞(Tet-on 基因修饰)是在 Jurkat D,E 细胞的基础上,利用 Tet-on 基因表达调控系统进行修饰构建的特殊细胞系。Jurkat D,E 细胞源自人 T 淋巴细胞白血病,而 Tet-on 系统的引入,使科研人员能够实现对特定基因表达的**调控,为研究基因功能和细胞生物学机制提供了强大工具。
从细胞特性来看,Tet-on 基因修饰赋予了 Jurkat D,E 细胞独特的基因表达调控能力。Tet-on 系统由四环素调控转录激活因子(rtTA)和四环素响应元件(TRE)组成。在缺乏四环素或其衍生物(如强力霉素)时,rtTA 不能与 TRE 结合,下游目的基因处于沉默状态;当加入强力霉素后,rtTA 与 TRE 结合,从而启动目的基因的表达。通过这种方式,研究人员可以在时间和表达水平上**控制目的基因在 Jurkat D,E 细胞中的表达,模拟基因在不同生理或病理状态下的表达变化。这种特性使得该细胞系能够有效避免因基因持续表达对细胞造成的毒性影响,同时可动态观察基因表达对细胞增殖、凋亡、信号传导等生物学行为的影响。
在细胞培养方面,Jurkat D,E(Tet-on 基因修饰)细胞与普通 Jurkat D,E 细胞的基础培养条件相似。常用含 10% 胎牛血清(FBS)的 RPMI 1640 培养基,添加适量抗生素防止污染,在 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中培养。细胞呈悬浮生长,当细胞密度达到 0.5×10⁶ - 1×10⁶ cells/mL 时,需进行传代,传代比例一般为 1:3 - 1:5 。由于 Tet-on 系统的存在,在培养过程中如需调控基因表达,需根据实验设计**添加或移除强力霉素。冻存时,采用含有 10% 二甲基亚砜(DMSO)、20% 胎牛血清的冻存液,将细胞置于液氮中保存,以维持细胞活性和 Tet-on 系统的功能完整性。
Jurkat D,E(Tet-on 基因修饰)细胞在科研领域应用广泛。在基因功能研究中,科学家可以通过该细胞系研究特定基因在 T 淋巴细胞中的功能,以及其对细胞发育、免疫应答的影响;在信号通路研究方面,可通过调控目的基因表达,分析相关信号通路的激活与传导机制;此外,在药物研发中,它能够用于评估药物对基因表达调控的影响,筛选靶向基因表达的新型药物,为疾病治疗提供新的策略和靶点。