HCT-8/VCR人结肠癌长春新碱耐药细胞
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HCT-8/VCR 人结肠癌长春新碱耐药细胞
HCT - 8/VCR 人结肠癌长春新碱耐药细胞由 HCT - 8 人结肠癌细胞经长春新碱(VCR)长期诱导筛选获得,作为研究肿瘤耐药的经典模型,为揭示结肠癌耐药机制与探索逆转策略提供了重要实验基础。
HCT - 8/VCR 细胞在体外呈贴壁生长,形态与亲代 HCT - 8 细胞相似,多为不规则多边形,但耐药特性显著。相较于 HCT - 8 细胞,HCT - 8/VCR 对长春新碱的耐药倍数可达数十倍。其耐药机制复杂多样,主要包括:细胞膜上 ABC 转运蛋白家族(如 P - 糖蛋白 P - gp、多药耐药相关蛋白 MRP1)的过表达,可将进入细胞内的长春新碱主动外排,降低胞内药物浓度;微管蛋白结构发生改变,使长春新碱与微管的结合能力下降,削弱药物抑制细胞分裂的作用;细胞内抗氧化酶活性增强,能有效清除长春新碱产生的活性氧,减轻氧化应激损伤;同时,细胞凋亡通路受阻,如 Bcl - 2 家族蛋白表达失衡,抑制细胞程序性死亡,从而维持细胞存活与增殖 。
培养 HCT - 8/VCR 细胞需维持其耐药表型。常用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基,为细胞生长提供营养物质和生长因子。为保持耐药性,需在培养基中添加低浓度长春新碱(通常 0.01 - 0.1μg/mL),若撤去药物,细胞耐药性会逐渐减弱。培养环境需控制在 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中,定期观察细胞生长密度,当融合度达 80% - 90% 时,用胰蛋白酶消化传代。由于长春新碱具有细胞毒性和潜在生物危害性,操作时需严格遵循生物**规范,防止药物泄漏与交叉污染。
在科研领域,HCT - 8/VCR 细胞应用广泛。在耐药机制研究中,通过转录组学、蛋白质组学等技术,可挖掘与耐药相关的关键基因和信号通路,为阐明结肠癌耐药的分子机制提供线索。在药物研发方面,该细胞系用于筛选能够逆转长春新碱耐药的新型化合物或联合用**案,评估药物对耐药细胞的增殖抑制、凋亡诱导效果,为结肠癌耐药患者寻找新的治疗选择。此外,HCT - 8/VCR 细胞还可用于探究肿瘤微环境对耐药性的影响,以及纳米载药系统克服耐药的可行性,推动结肠癌精准治疗的发展。