诱导型一氧化氮合酶ELISA试剂盒 技术说明
● 试剂盒操作步骤如下: ●
1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。
2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。
3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。
4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。
5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。
10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。
11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。
12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。
13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。
骨粘连蛋白ELISA试剂盒(多种种属)实验科研认可品牌
诱导型一氧化氮合酶ELISA试剂盒,本应用试剂盒已完成多中心临床验证,并通过国家食药监总局的认证。我司通过建立覆盖欧美的全球采购中心,与欧美1000多个品牌建立了正式的代理与合作,涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,具有压倒性地优势。产品领域:分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域。主营产品:流式抗体、ELISA试剂盒、标准品和对照品、生化试剂、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备。
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●试剂盒检测原理●:IL-10检测试剂盒使用包被有人IL-10特异性抗体的96孔酶标板,标准品和样品被加入到孔中,样品中存在的IL-10通过固相的抗体与孔结合。洗涤后加入生物素化的抗人IL-10抗体。
洗去未结合的生物素化抗体后,将HRP-标记的链霉素加入到到孔中。 再次洗涤板孔,向孔中加入TMB底物溶液,底物显色与所结合的IL-10量成比例。 加入终止液颜色从蓝色变为黄色,并且在450nm处测量颜色的吸光度值。
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编辑:小檀20180921