泌乳素释放肽ELISA试剂盒 ELISA Kit
●分析数据的处理:●
通常，测定工作获得一系列有关数据以后，需按以下原则记录、运算和处理。
1、记录与运算规则
主要说明食品分析中数据记录与计算，其均按有效数字计算法则进行，即：
① 除特殊规定外，一般可疑数为后一位，有±1个单位的误差；
② 复杂运算时，其中间过程可多保留一位，后结果需取应有的位数；
③ 加减法计算的结果，其小数点以后保留的位数，应与参加运算各数中小数点后位数小的相同；
④ 乘除法计算的结果，其有效数字保留的位数应与参加运算各数中有效数字位数少者相同；
2、可疑值的取舍
同一样品进行多次测定，常发现个别数据与其他数据相差较大，对这些不如意的数据不能任意弃去。除非分析者有足够的理由确证这些数值是由于某种偶然过失或外来干扰而剔除外，否则都应当依据误差理论来确定这些数据的取舍。
3、标准曲线绘制
用吸光光度法、荧光光度法、原子吸收光度法、色谱分析法对某些成分进行测定时，常常需要制备一套具有一定梯度的系列标准溶液，测定其系数（吸光度、荧光强度、峰高），绘制标准曲线。在正常情况下，此标准曲线应该是一条通过原点的直线，但在实际测定时，常出现某一、二点偏离直线的情况，这时，用小二乘方回归法绘制标准曲线，就能得到合理的图形。小二乘法计算，然后按回归方程式计算结果，绘制标准曲线。
4、测定结果的校正
在食品分析中，常常因为系统误差，使测定结果高于或低于检测对象的实际含量，即回收率不是100%，所以需要在样品测定的同时用加入回收法测定回收率，再利用回收率按下式对样品的测定结果加以校正。
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● 试剂盒操作步骤如下： ●
1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知，因此有必要检测宽范围的稀释度。
2.制备硝酸纤维素膜，用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说，一抗要检测一到两个稀释度，而二抗要检测两到三个稀释度。
3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl)，以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品，在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟，或直至无可见水分。
4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点，室温震荡孵育1h。
5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗，并加到膜上，室温震荡孵育1h。
6.用洗涤液洗膜4次，每次5分钟，用尽可能大体积的洗脱液。
7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗，并加到膜上，室温震荡孵育1h。
8.用洗涤液洗膜4次，每次5分钟，用尽可能大体积的洗脱液。
9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。
10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。
11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。
12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。
13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。
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编辑：小檀20180918