巨噬细胞炎性蛋白-1βELISA试剂盒 精品试剂盒

引起 ELISA 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点，试剂因素、标本因素和操作因素。 试剂因素：1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用，包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异，还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如：有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%，标记酶的活性及显色液的稳定性比较差，使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为 1 年，好选择刚出厂的试剂盒。 4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围，用一种指标来冒充其它指标，造成各种种属、各种指标都可以做的假象。 标本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 外源性物质:外源性物质常常是由于用于 ELISA 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。

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●稳定转染●：即进入细胞的质粒整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去。这是相对瞬时转染而言的。 瞬时转染的表达时间短暂，外源基因导入整合基因组的几率非常低，绝大部分以游离形式存在，不能随细胞分裂而一同复制，导致后拷贝数被稀释，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多为瞬时转染。 ●一般如下情况需要构建稳定株●： 1. 长期在目的细胞中研究基因功能，通过构建稳定株，可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本，也极大方便实验研究； 2. 部分蛋白半衰期极长，瞬时 RNA 只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，通过构建稳定株可以实现更好的基因干扰效果； 3. 瞬转往往会引入极高拷贝数的表达，导致因为人为因素造成实验结果的不**，构建稳定株可以帮助筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究； 4. 需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的； 5. 需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等，往往需要构建成稳转株。

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编辑：小檀20180918