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基质金属蛋白酶抑制因子3ELISA试剂盒制备的详细步骤

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酶联免疫检测法检测原理以及本方法的优点? ● 原理:酶联免疫吸附试验法的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。 再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 ● 优点:具有很高的特异性;另一方面由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性;ELISA法还具有简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,且适用于大批量标本的检测。

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酶联免疫吸附实验(ELISA)已经成为实验室常用的检测蛋白含量变化的实验技术,常用的检测方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗检测抗原的变化。这里使用两种抗体的原因一方面是信号放大的需要,另一方面是要减少成本。假如每种抗体都用酶或者荧光素标记的话,那将会需要多少种标记的抗体呢?而且可以肯定价格一定不菲。而用标记二抗的方法就可以大大减少需要标记抗体的数目,同时也能提高标记抗体的效用,这样就能用尽量少的标记抗体满足尽量多的实验要求。

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编辑:小檀20180914