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●稳定转染●:即进入细胞的质粒整合入细胞基因组中,并能随细胞分裂稳定传递下去。这是相对瞬时转染而言的。 瞬时转染的表达时间短暂,外源基因导入整合基因组的几率非常低,绝大部分以游离形式存在,不能随细胞分裂而一同复制,导致后拷贝数被稀释,无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染,多为瞬时转染。 ●一般如下情况需要构建稳定株●: 1. 长期在目的细胞中研究基因功能,通过构建稳定株,可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本,也极大方便实验研究; 2. 部分蛋白半衰期极长,瞬时 RNA 只能干扰表达,无法去除已经表达的目的蛋白,通过构建稳定株可以实现更好的基因干扰效果; 3. 瞬转往往会引入极高拷贝数的表达,导致因为人为因素造成实验结果的不**,构建稳定株可以帮助筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究; 4. 需要用诱导表达系统的,主要是一些致死基因或者是需要时空表达的; 5. 需要用细胞做动物实验的,比如裸鼠成瘤等,往往需要构建成稳转株。

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检验原理:●本试剂盒利用膜免疫层析原理,采用竞争法,在硝酸纤维素膜的检测线处包被BSA与25-OH维生素D3的偶联物,在质控线处包被兔抗绵羊IgG多克隆抗体,金标垫上固定胶体金标记的25-OH维生素D单克隆抗体。检测时,首先用处理试剂将样本中的25-OH维生素D与维生素D结合蛋白分离,游离的25-OH维生素D可与金标垫上的胶体金标记25-OH维生素D单克隆抗体发生结合形成免疫复合物,该免疫复合物与未结合的胶体金标记物在层析作用下沿膜同时移动,经过检测线时,未结合的胶体金标记物与偶联物结合而显色,经过质控线时,免疫复合物与未结合的胶体金标记物均能与兔抗绵羊IgG多克隆抗体而显色。检测线处显色深浅反应样本中25-OH维生素D的含量,由于样本中的25-OH维生素D与检测线处的BSA与25-OH维生素D3的偶联物存在竞争关系,因此检测线的显色深浅与样本中的25-OH维生素D是反比关系。通过已拟定的标准曲线可以由显色的灰度值计算得到25-OH维生素D的含量。 产品特点:● 指尖末梢血、全血和血清样本,满足不同客户需求 ● 样本无需前处理,直接测定,仅需15分钟可得结果 ● 可进行多样本同时检测,上机检测仅需5秒钟 ● 操作简便快速,与美康胶体金免疫分析仪配套使用 临床意义: ● 维生素D健康水平监测 ● 骨质疏松、骨关节炎病情监测 ● 孕妇维生素D缺乏症辅助诊断、疗效评估 ● 青少年维生素D缺乏辅助诊断;佝偻病鉴别诊断 ● 高钙血症、维生素D中毒辅助诊断、疗效监测

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编辑:小檀20180907