突破早期诊断大关,对疾病诊治的提升有着非同寻常的意义。
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 原理:●细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。
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ELISA应用:ELISA检测技术早在19世纪70,80年代就开发出来用于替代放射性同位素标记技术用于研究蛋白质间的相互作用(配体-受体,抗原-抗体),到如今已经接近50年的历史了。这个技术从科研的角度来说已经不具备**性,没有太多的价值,不值得专门进行研究,更多的是一个使用的工具。工业应用落后于基础研究,ELISA技术在制药领域的应用随着近20年生物制药领域的迅猛发展展现着越来越多的使用价值,当然ELISA的应用情况也越来越复杂,这样的复杂性也使得早期的基础研究并不再具有很好的指导意义,ELISA方法滥用错用往往导致实验结果出现系统性偏差,影响实验结果的真实性,做出错误的选择。本文的写作目的旨在作为文献之外关于ELISA实际应用的一个总结,反补基础研究的不足,使得该技术更具使用价值。
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编辑:小檀20180906
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